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图为：工作人员把存放病毒的密封盒放进特殊储存罐 楚天都市报记者李辉摄
图为：实验师张艳芳从冰箱中取出病毒 近日，中科院武汉病毒研究所微生物菌（毒）种保藏中心，正式成为全国四个“国家级保藏中心”之一。这意味着，该中心具备资质保藏埃博拉、尼帕等危害等级最高的病毒病原，便于开展相关科研活动。 这里拥有亚洲最大的病毒保藏库，保藏着1500多株各类病毒的分离株，涵盖全球已对外发布病毒科的1/3，其中包括让人闻之色变的寨卡、新疆出血热等病毒株。 5月16日，楚天都市报记者探访了这个神秘的病毒库，见证病毒从“清醒”到“沉睡”的奇妙过程。 本报记者见证病毒样本分离 “一般人提到病毒就会害怕，这是因为不了解。”中科院武汉病毒研究所保藏中心副主任邓菲说。经过专业培训的实验员，虽然天天与病毒打交道，但在严密措施保障下，可以安全进行非烈性病毒的操作。 5月16日，楚天都市报记者获准进入P2级病毒样本分离室。P2级是相对较低的防护级别，但仍然“戒备森严”。在实验师吴巧丽的示范下，记者穿上长袖白大褂，套上蓝色防护衣，再戴上口罩、帽子、鞋套、乳胶手套、塑料薄膜手套等。“这些都是专用的一次性防护用品，要求是尽量不暴露肌肤。”吴巧丽说。 实验师张艳芳正在进行寨卡病毒的分离。她坐在生物安全柜前，胳膊在柜子里面操作，身体其它部位都在外面，眼睛隔着透明罩盯着手中的移液器，将紫红色的寨卡病毒分装到不同的培养瓶中，进行细胞培养。“紫红色是指示剂的颜色。病毒是纳米级的最小的生物，没有颜色，我们会加入特殊的荧光染料，以便确定它们的存在。”张艳芳说。她事先在操作台上垫了吸水巾，一旦出现样本泄露，可以第一时间处理掉。 无论是移液，还是培养，张艳芳的动作都很轻缓。“操作过程中可能产生气溶胶，看不见，人一旦接触就可能感染，所以要非常小心。”她说。记者注意到，安全柜上方有个类似抽油烟机的装置，把气流往里抽，任何细小的气体反应都出不了安全柜。 各种病毒在不同温度下沉睡 神秘的病毒保藏库有两道大门，外面的电子门上有“生物危险”的警示标志。 与室外的闷热相比，保藏库内比较清凉。不足100平方米的库房，被隔成4个小房间，其中一间放着一台超大容量冰箱。其它三间分别是 -40℃、-80℃、-150℃的病毒保藏房，每间房都整齐摆放着多台冰箱，所有冰箱上都挂着一把大锁。 邓菲介绍，保藏库的窗户上装有红外线防盗系统。工作人员进入库房、打开冰箱，必须至少两人在场，且要履行完善的登记手续。 张艳芳戴着特制的防冻手套，打开一个显示实时温度为-77℃的冰箱。她介绍，每台冰箱上都有发射器与办公电脑相连，可远程监控冰箱温度变化，还有备用电源及时保障。 记者看到，该冰箱里面有4扇小门。张艳芳打开其中一扇门，里面排列着25个不锈钢小抽屉。她拉开一个抽屉，塑料容器盒里排列着多支病毒冻存管，有的呈蓝色，也有呈红色，管身贴着编号和二维码。“这些编号都有建档，需要取什么病毒株，只要用电脑一查，就知道它的详细位置。”邓菲说。这些小小的冻存管中，保藏着肝炎、寨卡、流感、疱疹等病毒，在外人听来有些不寒而栗，但对这里的科研人员而言，它们都是有用的生物资源。 “生死循环”让病毒保持活性 “我们和农业、林业、卫生等系统都有合作，接收的病理样本类型很多，有血液、尿液、粪便、咽拭子、脑脊液、疱疹液等。”邓菲介绍。病毒保藏前的工作非常复杂，从接收病理样本到进行检测、分离样本、低温冷冻，病毒从“清醒”到“沉睡”，是一个不断精细化的过程。 当检测指向某些病毒后，实验师会对其进行提纯培养。“99%的微生物不可培养，病毒属于剩下的1%。它们不能单独存在，但可以通过细胞培养存在。”邓菲介绍。病毒通过细胞膜侵入细胞后，会不断自我繁殖，滴度越来越高。只有背景清晰、滴度最高的标准化病毒，才能进入保藏库。每个病毒株都有多个备份，清晰可溯源。 -40℃冰箱保藏的多是病料。病毒大多保藏在-80℃冰箱，能在一段时间内保持高活性度。一旦病毒活性不足，要对其进行“复苏”，即把病毒接种到新鲜细胞中，启动新一轮感染过程，让病毒数量和活性回复到高水平状态，再进行保藏。 在60℃的环境中，病毒几分钟就会死亡。邓菲介绍，将病毒株从休眠状态下复活，就像一场“生死循环”。每种病毒的活化，都需要相应的培养环境。比如寨卡病毒，要让它感染猴子细胞，只能在37℃的培养箱中进行；而要让它感染蚊虫细胞，则必须在28℃的培养箱中进行。 “年纪”最大的病毒株30多岁 邓菲介绍，中科院武汉病毒研究所微生物菌（毒）种保藏中心拥有亚洲最大的病毒保藏库，目前保藏着1500多株各类病毒的分离株，涵盖全球已对外发布病毒科的1/3，包括人类医学病毒、人畜共患病毒、动物病毒、昆虫病毒、植物病毒等。其中，“年纪”最大的病毒株已经30多岁。 “这里保藏的新疆出血热病毒，是我国唯一的四级病毒。像寨卡病毒，我们进口了亚洲株、欧洲株、美洲株，分离培养出了种子批、工作批等，不仅保藏了资源，还服务于科研工作。”邓菲说。该中心晋升“国字号”后，不仅与在汉建设的生物安全四级实验室相匹配，还可以按照国家相关规定，接收、检定、集中储存与管理菌（毒）种或样本，向合法从事病原微生物实验活动的单位提供菌（毒）种或样本，并出具国家标准菌（毒）株证明，并在技术研究、业务培训等方面发挥更大作用。 “经过30多年累积的病毒资源，为科研工作提供了有力保障。尤其是最近几年，保藏中心发展很快，每年新保藏一两百种病毒。每一个病毒株都是宝贝，虽然有的暂时没有实际作用，但未来一旦有需求，就会被唤醒并投入应用。”邓菲说。 |
